人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 HBMEC

HBMEC分離自人大腦組織，原代凍存，冰凍運(yùn)輸。每管細(xì)胞密度超過(guò)5×105/ml。細(xì)胞特性經(jīng)vWF/Factor VIII和CD31 (P-CAM) 免疫熒光鑒定，能夠攝取DiI標(biāo)記乙酰化低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL)。本細(xì)胞經(jīng)檢測(cè)不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母菌和真菌。

分離純化方法：采用胰酶、膠原酶聯(lián)合消化法分離人腦惡性膠質(zhì)瘤微血管片段,利用結(jié)合CD105抗體的MACS MicroBeads免疫磁珠內(nèi)皮細(xì)胞分選系統(tǒng)純化GDMEC;應(yīng)用倒置顯微鏡、透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)特征,和免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)顯示血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性表面標(biāo)志,流式細(xì)胞術(shù)、MTr法研究增殖和凋亡,鑒定所獲得的GDMEC。結(jié)果所獲GDMEC具備多種典型的微血管內(nèi)皮細(xì)胞特征:細(xì)胞呈多邊形或梭型、呈鋪路石樣生長(zhǎng);電鏡下見(jiàn)weibel-Palade小體;FⅧ-RAg陽(yáng)性;